Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa)
количественное определение ДНК анаэробных неспорообразующих бактерий
(информация для специалистов)
Pseudomonas aeruginosa представляет собой условно-патогенный микроорганизм в виде грамотрицательной палочки с закругленными концами. Она способна вызывать острое инфекционное поражение дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, мягких тканей и других органов и систем организма.
До 20% всех нозокомиальных инфекций вызвано синегнойной палочкой. До 35% инфекций мочеполовой системы вызывается этим микроорганизмом. Кроме того, роль Pseudomonas aeruginosa доказана в развитии около 25% гнойных хирургических процессов и первичных бактериемий.
Этот микроорганизм очень распространен в окружающей среде: встречается в почве, воде, открытых водоемах, на растениях. Устойчив к действию многих дезинфицирующих растворов, во многих может даже размножаться. Погибает лишь под действием 5% раствора хлорамина, 3% раствора перекиси водорода и 2% раствора карболовой кислоты (фенола). Фактором устойчивости к действию антибиотиков является способность образовывать вокруг своих колоний слизеподобную капсулу – гликокаликс.
Источником инфекции является больные люди и носители инфекции. Передача возбудителя осуществляется контактно-бытовым, воздушно-капельным и пищевым путями через продукты, воду и предметы обихода.
К группам риска по развитию синегнойной инфекции относятся:
- лица с иммунодефицитом (ВИЧ-инфицированные, СПИД, беременные, имеющие другие соматические заболевания, онкологические заболевания, пациенты после трансплантации органов),
- детский возраст (особенно новорожденные),
- инъекционные наркоманы,
- ожоговые больные.
Синегнойная палочка может поражать различные органы и системы организма, при этом клиническая картина заболевания не будет иметь особых специфических признаков (исключение составляет поражение мягких тканей, при котором отделяемое из раны становится сине-зеленого цвета). Это затрудняет диагностику в первые дни заболевания. Особенностями синегнойной инфекции является склонность к затяжному хроническому течению инфекции с частыми рецидивами различной степени выраженности, требующими длительного лечения. Кроме того, Pseudomonas aeruginosa обладает высокой устойчивостью к антибиотикотерапии, что часто приводит к неблагоприятным исходам заболевания и несвоевременному началу лечения.
Обнаружить синегнойную палочку можно бактериологическим методом посева на питательные среды и методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. ПЦР обладает высокой специфичностью и чувствительностью, а также сокращает сроки получения результата, что соответственно уменьшает период до начала терапии.
Суть метода:
При проведении полимеразной цепной реакции в реальном времени с помощью специальных ферментов ДНК-полимераз в ходе каждого цикла происходит удвоение ДНК. Таким образом, после проведения множества циклов в случае наличия исходно хотя бы 1 ДНК бактерии мы получаем достаточное число ДНК, чтобы уловить их с помощью флуоресцентного красителя. При этом возможно получить качественный ответ (есть или нет возбудитель заболевания в пробе) и количественный ответ (сколько конкретно молекул ДНК обнаружено в материале).
Показания для проведения исследования:
- Длительные (до нескольких месяцев) проявления заболеваний мочевыводящих органов: уретритов, циститов, пиелонефритов, трудно поддающиеся антибактериальной терапии.
- Устойчивая к действию антибиотиков пневмония.
- Появление сине-зеленого раневого отделяемого у ожоговых больных, при трофических язвах на конечностях, в ранах после хирургического вмешательства.
- Воспалительные заболевания других органов и систем, отличающиеся устойчивостью к действию антибиотиков и связанные преимущественно с медицинскими вмешательствами или длительным пребыванием в стационаре.
Подготовка пациента к проведению исследования:
- Взятие материала (моча) для исследования у женщин рекомендовано проводить до менструации или через 2 дня после ее окончания.
- Мужчинам рекомендовано воздержаться от мочеиспускания за 3 часа до взятия материала из мочеиспускательного канала.
- При взятии крови для проведения исследования особой подготовки не требуется.
- За 8-12 часов до сбора мокроты необходимо выпить большой объем воды. Не рекомендовано принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Референсные значения:
В норме ДНК Pseudomonas aeruginosa в образце не обнаруживается. Результат отрицательный.
Интерпретация результатов:
Положительный результат говорит об обнаружении ДНК синегнойной палочки и об инфицировании пациента Pseudomonas aeruginosa.
Возможные влияния на результат:
Ложноотрицательный |
Ложноположительный |
Некачественное взятие материала (мало материала). |
Ошибка при обработке материала в лаборатории (попадание посторонних молекул ДНК в пробу). |
Взятие материала у женщин во время менструации. |
|