Стрептококк группы А (Streptococcus pyogenes)
качественное и количественное определение ДНК
(информация для специалистов)
Streptococcus pyogenes является грамположительной бактерией шаровидной формы, способной вызывать большое разнообразие заболеваний в организме человека (острый фарингит, импетиго, пневмония, септический артрит, сепсис, синдром токсического шока и некротизирующий фасцит).
Для определения Streptococcus pyogenes используется несколько методов: бактериологический посев биоматериала на специальные среды, серологические методы и метод полимеразной цепной реакции в реальном времени, который обладает высокой специфичностью и чувствительностью. Кроме того, метод ПЦР позволяет получить результаты в кротчайшие сроки, что ускоряет постановку диагноза и начало терапии, а соответственно снижает риск развития осложнений и облегчает течение самого заболевания. Еще одним преимуществом метода ПЦР является тот факт, что этот метод можно назначать на фоне приема антибактериальной терапии, так как обнаруживаются и ДНК живых бактерий и лизированных.
Суть метода:
При проведении полимеразной цепной реакции в реальном времени с помощью специальных ферментов ДНК-полимераз в ходе каждого цикла происходит удвоение ДНК. Таким образом, после проведения множества циклов в случае наличия исходно хотя бы 1 ДНК бактерии мы получаем достаточное число ДНК, чтобы уловить их с помощью флуоресцентного красителя.
Показания для проведения исследования:
- При симптомах острого фарингита: боль при глотании, отек и эритема слизистой зева, гнойное отделяемое с поверхности миндалин, болезненный регионарный лимфаденит.
- При симптомах острой ревматической лихорадки: мигрирующий полиартрит или артралгия, боль в области сердца, немотивированная слабость, кольцевидная эритема и подкожные узелки, хореический гиперкинез.
- При симптомах постстрептококкового гломерулонефрита: отек (периорбитальной области или генерализованный), макрогематурия, немотивированная слабость, протеинурия менее 3,5 г/сутки, артериальная гипертензия.
- При обследовании пациента с рецидивирующим фарингитом, а так же членов его семьи.
- При наличии вируса гриппа H1N1, который является фактором риска для развития инфекции, вызванной Streptococcus pyogenes.
- При симптомах внебольничной пневмонии: внезапное начало заболевания, лихорадка, одышка, боль в грудной клетке, кашель с отхождением гнойной мокроты.
- При наличии факторов риска септического артрита: младенческий и старческий возраст, иммуносупрессивная терапия, соматические заболевания, гемодиализ.
- При симптомах септического артрита: боли в суставе в покое и при движении, эритема кожных покровов над областью сустава, нарушение подвижности в суставе, повышение температуры тела, немотивированная слабость.
Подготовка пациента к исследованию:
- За 8-12 часов до сбора мокроты необходимо выпить большой объем воды.
- Не рекомендовано принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Референсные значения:
В норме ДНК Streptococcus pyogenes в образце не обнаруживается. Результат отрицательный.
Интерпретация результатов:
Положительный результат говорит об обнаружении ДНК стрептококка группы А и об инфицировании пациента Streptococcus pyogenes.
Для точной постановки диагноза в случае с определением Streptococcus pyogenes необходимо так же принять во внимание данные других лабораторных исследований и наличие клинических симптомов. При отсутствии изменений (кроме метода ПЦР) пациент оказывается носителем Streptococcus pyogenes. Данный факт встречается у 12-20% детей школьного возраста и 2,4-3,7% взрослых людей. При проведении количественной оценки число обнаруженных молекул ДНК Streptococcus pyogenes в случае носительства будет существенно ниже, чем в случае болезни с клиническими симптомами.
Возможные влияния на результат:
Ложноотрицательный |
Ложноположительный |
Некачественное взятие материала (мало материала). |
Ошибка при обработке материала в лаборатории (загрязнение пробы посторонними молекулами ДНК). |